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冷凍研磨儀對(duì)老鼠內(nèi)臟組織的實(shí)驗(yàn)研磨分析
時(shí)間:2021-05-21 作者:admin

  地點(diǎn):安徽省疾病預(yù)防控制中心毒理科病媒生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)  


  背景:鼠類不僅傳播鼠疫、流行性出血熱、鉤端螺旋體病、斑疹傷寒等多種疾病,嚴(yán)重危害人類健康;而且通過嚙咬、盜食、污染等方式給工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)等造成直接或間接的經(jīng)濟(jì)損失。在此背景下,通過深入細(xì)致的調(diào)研工作,了解鼠類防制技術(shù)規(guī)范的現(xiàn)狀,并在遵循相關(guān)國家、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上,編制符合深圳市特點(diǎn)的鼠類防制技術(shù)規(guī)范,有助于安全、有效地預(yù)防和控制鼠類,保護(hù)人民群眾身體健康和生 命安全,提升安徽省的環(huán)境衛(wèi)生水平?! ?/p>

一、材料和方法: 

  樣品來源于居民區(qū)及收治醫(yī)院周 圍 環(huán) 境 采 集 目 標(biāo) 病 媒 生 物。160份鼠肺樣品來自本地,15份蜚蠊體表擦拭子來自安徽等地。所有樣品均凍存于-80度待檢?! ?/p>

二、儀器及試劑:  

  1、浙江優(yōu)嘉全自動(dòng)樣品冷凍研磨儀  

  2、熒光定量PCR分析儀  

  3、高效病毒濃縮試劑盒  

  4、巢式RT-PCR所采用的引物,一步法RT-PCR試劑盒  

  5、RNA提取試劑盒


  樣品RNA的提取別取待檢鼠肺組織于全自動(dòng)樣品冷凍研磨儀充分再加入異硫酸氰胍溶液,充分溶解后于負(fù)20度保存?zhèn)溆?,蜚蠊體表擦拭子中加入無菌生理鹽水少許于4度中過夜,擠壓后取出棉拭子,將剩余液體10000r/min離心5min,其上清液則用高效病毒濃縮試劑盒進(jìn)行濃縮,濃縮所得的晶體中再加入異硫酸氰胍溶液,充分溶解后于負(fù)20度保存?zhèn)溆?,按照試劑盒的說明 從樣品的異硫酸氰胍溶液中提取提取所得的RNA于負(fù)20度中保存?zhèn)溆??! ?/p>

實(shí)驗(yàn)步驟:  

  1、準(zhǔn)備全自動(dòng)樣品冷凍研磨儀?!?/p>

  2、金屬適配器,以及鋼珠適配器?! ?/p>

  3、將老鼠組織剪碎,放入研磨管,加入鋼珠。  

  4、將適配器裝入研磨儀中,開啟低溫功能保持溫度?! ?/p>

  5、設(shè)定參數(shù),啟動(dòng)儀器至研磨程序結(jié)束,可得到如圖所示樣品。

  樣品研磨前后效果圖

儀器介紹:

  冷凍研磨儀

  全自動(dòng)樣品冷凍研磨儀:一種快速、高效、制冷的研磨系統(tǒng)。它能在非常短的時(shí)間內(nèi)將土壤、植物和動(dòng)物的組織/器官、細(xì)菌、酵母、真菌、孢子、古生物標(biāo)本等樣品完成研磨、粉碎、混合機(jī)細(xì)胞破壁。廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、醫(yī)藥、生化、環(huán)境、地質(zhì)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、質(zhì)檢、材料等領(lǐng)域?! ?/p>

優(yōu)勢(shì):  

  研磨效果具有高度可重現(xiàn)性、觸屏操作,可存儲(chǔ)10條參數(shù)、能夠有效抑制核酸降解,保留蛋白質(zhì)活性、研磨時(shí)處于全封閉狀態(tài),無交叉污染,低噪音、可輕松處理高韌塑料、高強(qiáng)塑料、樹脂等難研磨樣品、具備安全罩及安全鎖,無需涉及液氮操作,安全性高。

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